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(5)将重组质粒导入大肠杆菌后,接种到添加了 等成分的培养基上,若呈现 色的菌落,即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落。
9.某自花传粉植物的药物P的合成依次受染色体上显性基因A、B、D控制。研究人员通过基因工程构建含质粒-A-B-D的大肠杆菌生产药物P,下图为基因表达载体的构建过程,其中代表氨苄青霉素抗性基因,表示四环素抗性基因。引物1序列为,引物2序列为。限制酶的识别序列及切割位点(从左向右均为)为KpnⅠ()、XbaⅠ()、BamHⅠ()、NcoⅠ()。基因B和D转录的模板分别是a链和d链。根据所学知识回答下列问题:
(1)PCR扩增目的基因时,引物的作用是 。常采用 来鉴定PCR的产物。
(2)为保证A基因正确连接到质粒上,需利用PCR1对A基因进行改造,所用引物1和引物2上分别含有 酶的识别序列,则据图判断A基因转录的模板链可能是 。一个A基因经过4轮循环后,得到的子代DNA分子中,只含有1种引物的DNA分子所占的比例为 。
(3)为了实现图中B基因和D基因的重叠延伸,PCR2和PCR3过程中需要分别在引物 的端添加互补序列。过程②复性过程中会形成多种杂交双链,其中能延伸得到B-D融合基因的为图中 (填字母)杂交形成的DNA。
(4)为保证B-D融合基因与质粒-A按图中方式连接,需要在引物3和引物5中分别添加限制酶 的识别序列。若筛选导入基因A-B-D的大肠杆菌,可将大肠杆菌依次放在含有氨苄青霉素、四环素的培养基中培养,筛选 的大肠杆菌即为目的菌。
题组三 细胞工程与胚胎工程
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