黄石市2025年春季学期高二期末统一测试(7月)历史答案!

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试题答案

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(2)提取胰岛B细胞中的mRNA
(3) 5' EcoRI和XhoI 2(n+1)-2
(4) X-gal、氨苄青霉素 白色
【解析】(1)启动子位于DNA上,是RNA聚合酶的识别和结合部位;分析题图可知,转录的方向为从左到右,且是从RNA的5’→3’,DNA链的-OH端为3’端,故胰岛素基因以A链作为模板进行转录;构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶,以防止质粒或目的基因自身环化及目的基因与质粒反向连接。
(2)逆转录是以mRNA为模板,合成DNA的过程,故为使胰岛素基因能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质,获取目的基因时通常先提取胰岛B细胞中的mRNA,然后再通过逆转录得到胰岛素基因。
(3)PCR扩增胰岛素基因的前提是获得一段已知目的基因的序列,以用于特异性制备PCR扩增需要的引物,目的基因与质粒连接时,需要将目的基因连接到质粒的启动子和终止子之间,它们之间含有XhoI、Mun I、Sal I、Nhe I、EcoR I识别序列,但Sal I、Nhe I在目的基因中也含有识别序列,若用它们切割,会破坏目的基因,若选择Mun I则会破坏质粒上的标记基因,所以为使PCR产物与质粒正确连接,设计引物时可将限制酶EcoR I和Xho I的识别序列添加在对应引物的5'端(子链延伸方向是5'→3');每合成一条新链会消耗一个引物,n次循环后一共有2(n+1)条链,其中有两条母链不需要消耗引物,故n次循环后,至少消耗引物2(n+1)-2个。
(4)由题意可知,β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色,将胰岛素基因与质粒连接后,重组质粒的lacZ(β-半乳糖苷酶基因)基因被破坏,氨苄青霉素抗性基因没有被破坏,不能合成β-半乳糖苷酶,不能催化底物(X-gal)水解产生蓝色物质,故呈菌落白色,因此将大肠杆菌接种到添加了氨青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌种。


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